Continous high-titer HIV-1 vector production

Abstract

La generación de células productoras estables para vectores lentivirales ha sido otro caballo de batalla importante para reducir costes y trasladar la terapia génica a un número mayor de pacientes. Sin embargo, la generación de líneas celulares empaquetadoras que establemente expresaran las proteínas de HIV-1 necesarias habías sido imposible hasta el momento debido a la toxicidad de las mismas. En este trabajo se desarrollo una estrategia para fomentar la aparición de clones que establemente expresaran las proteínas necesarias de HIV-1 para empaquetar al vector. Esto se consiguió incrementando la eficacia de integración de los casettes de expresión que las expresaban, utilizando para ello vectores retrovirales. Esta estrategia trajo consigo la generación de las primeras líneas empaquetadoras estables para la producción de vectores lentivirales. Aunque su uso no ha sido generalizado debido a algunos problemas de estabilidad durante la expansión, los protocolos utilizados siguen utilizándose para generar líneas celulares productoras de altos niveles de proteína para diferentes aplicaciones.