Development of an all-in-one Lentiviral vector system based on the original TetR for the easy generation of Tet-ON cell lines.

Abstract

Desarrollar vectores lentivirales regulables por drogas podría mejorar muchas estrategias de terapia génica por varias razones. Por un lado, podría permitir un control temporal y reversible de la expresión del gen terapéutico, algo esencial para evitar efectos adversos que podrían surgir de la expresión continua del gen en determinados contextos. Por otor lado, permiten ajustar la dosis del gen terapéutico según las necesidades del paciente, lo que es especialmente útil en enfermedades donde la dosis óptima puede variar con el tiempo. En este artículo desarrollamos el primer sistema lentiviral inducible por doxiciclina “todo en uno” basado en el represor original (tetR) sin transactivadores. Este enfoque fue innovador porque no solo simplificaba el proceso de creación de celulares regulables por tetraciclina, evitando la necesidad de clonación celular y selección antibiótica, sino que permitía hacerlo sin transactivadores. Estas dos características lo hacían muy útil tanto para investigación básica como para su aplicación a terapia génica. El sistema Tet-ON desarrollado en este articulo permite un control de la expresión de transgenes mediante la administración de doxiciclina (Dox). Curiosamente, demostramos que, a mayor número de copias integradas, mejor funcionaba el sistema, permitiendo la expresión de niveles muy altos del transgene en presencia de Dox y niveles muy bajos en su ausencia. Desarrollos posteriores de mi grupo consiguieron generar una batería de vectores lentivirales regulables basados en parte en este artículo.