Biopsia líquida basada en detección y caracterización de células epiteliales circulantes para la intercepción del carcinoma hepatocelular Roa Colomo, Amparo Salmerón Escobar, Francisco Javier Garrido Navas, María del Carmen Universidad de Granada. Programa de Doctorado en Medicina Clínica y Salud Pública Introducción y motivación de la tesis: El carcinoma hepatocelular (CHC) es el sexto cáncer más frecuente y la tercera causa de muerte por cáncer en el mundo. La falta de biomarcadores diagnósticos y pronósticos impide estratificar a los pacientes según su riesgo de desarrollar cáncer, lo que contribuye a su baja supervivencia. El diagnóstico en cirróticos se establece con pruebas de imagen dinámica por lo que la ausencia de biopsia tisular complica el estudio de su biología molecular y la detección de nuevos marcadores pronósticos y dianas terapéuticas. Por este motivo, es interesante el estudio de la biopsia líquida mediante la detección de células epiteliales circulantes (CECs) en sangre periférica de pacientes con cirrosis hepática o CHC, ya que es una forma no invasiva y segura de obtener muestras seriadas del paciente para su diagnóstico y seguimiento. El objetivo de esta tesis doctoral fue determinar el valor pronóstico de la detección y caracterización de CECs en pacientes con CHC y con cirrosis hepática sin CHC. Se evaluó la heterogeneidad fenotípica y genética de las CECs basada en el receptor de asialoglicoproteína-1 (ASGR1) y la expresión del micro-ARN miR-122-5p como posibles herramientas de diagnóstico y pronóstico en pacientes con CHC y cirrosis hepática. Métodos: Se trata de un estudio observacional prospectivo de cohortes en el que se incluyeron 113 pacientes de los cuales 71 tenían CHC en distintos estadios de la enfermedad y 42 cirrosis hepática sin CHC, a los que se les hicieron determinaciones seriadas de los niveles de CECs. Se extrajeron muestras de sangre periférica y se aislaron las CECs mediante selección inmunomagnética positiva. La caracterización fenotípica se validó mediante doble inmunocitoquímica para citoqueratina (CK) y ASGR1 y la caracterización genética se validó por hibridación in situ con miR-122-5p. Las CECs se visualizaron mediante microscopía confocal. Resultados: Se detectaron CECs en 78 pacientes (69,03%), siendo significativamente más frecuente en pacientes con CHC (54/71; 76,05%) que en pacientes sin CHC (24/42; 57,14%) (p=0,023). Destaca la heterogeneidad fenotípica de las CECs en base a ASGR1 tanto intra como interindividualmente. La presencia de CECsCK+ASGR1- se relacionó significativamente con la aparición de cáncer (p = 0,012) y se observó que existe correlación positiva entre la expresión de ASGR1 y miR-122-5p ya que todas CECsCK+ASGR+ también mostraron positividad para miR-122-5p, demostrando su origen hepático. Los pacientes con CHC en estadios tempranos mostraron significativamente mayor supervivencia global que los pacientes con CHC avanzado (p = 0,018). Sin embargo, esta diferencia sólo se observó en pacientes con CECs (p = 0.021). La supervivencia libre de progresión fue significativamente menor en los pacientes con CHC y CECsCK+ASGR1-en comparación con los pacientes con cirrosis hepática sin CHC (p < 0,0001). Conclusión: Nuestros resultados resaltan la utilidad clínica de la caracterización de CECs con ASGR1/miR- 122-5p en pacientes con cirrosis hepática o CHC, para identificar el origen hepático de las CECs y para detectar fenotipos potencialmente más agresivos (con pérdida de ASGR1/miR- 122-5p), lo que serviría como herramienta predictiva y pronóstica. 2024-06-05T07:34:12Z 2024-06-05T07:34:12Z 2024 2024-04-05 doctoral thesis Roa Colomo, Amparo. Biopsia líquida basada en detección y caracterización de células epiteliales circulantes para la intercepción del carcinoma hepatocelular. Granada: Universidad de Granada, 2024. [https://hdl.handle.net/10481/92338] 9788411953016 https://hdl.handle.net/10481/92338 spa http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ open access Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional Universidad de Granada