Separación cromatográfica de Nucleótidos adenínicos para el estudio de su degradación hidrolítica

Abstract

Se ha estudiado la separación de adenina, AMP, ADP Y ATP mediante cromatografía en columna de cambio iónico; dirigida hacia el estudio de reacciones hidrolíticas de dichos nucleótidos, catalizadas por ácidos. De los tres intercambiadores iónicos estudiados el DEAE-Sephadex-A-25 nos ha proporcionado los mejores resultados. Según nuestras experiencias tiene la ventaja de poderse emplear un tampón equilibrante cuyo margen de pH sea de 8 a 8,5 y su fuerza iónica 0,1. Manteniendo constantes estos parámetros se puede variar la composición química del tampón, por lo que el mismo ácido que catalice una determinada reacción hidrolítica puede entrar a formar parte del tampón, consiguiéndose de esta forma prescindir del anión que perturbe la mancha de la separación. Se completa el estudio con una técnica de cambio iónico en capa delgada mediante DEAE-celulosa que nos ha servido para la identificación de los derivados adenínicos separados.

It has been investigated the separation of adenine nucleotides, AMP, ADP and ATP, across the ionic exchange cromatography, directed to the study of hidrolytic reactions of this nucleotides catalizated by acids. Of the tree ionic exchangers, the DEAE-Sephadex A-25 enables' the best results. This exchanger makes possible the use buffer solutions with pH from 8 to 8,5 and its ion1c strength 0,1. The chemical compositions of the buffer solution is easily changeable and the acid catalyst can form the fuffer composition. The study of adeninic nucleotides is made by means of the thin layer chromatography.