Análisis comparativo de la utilidad diagnóstica de marcadores relacionados con la placa desmosomal en biopsias de carcinomas de pulmón de células no pequeñas

Abstract

El cáncer de pulmón tiene la incidencia más alta en los países en desarrollo donde el tabaquismo es más frecuente, con una variación de más de 20 veces en la incidencia entre regiones, además, es la principal causa de mortalidad por cáncer en todo el mundo, sumando ambos sexos, y hombres y mujeres por separado. Representa por tanto un problema de salud mundial y de primera magnitud. Está integrado por un grupo heterogéneo de tumores con características morfológicas, inmunohistoquímicas y genéticas diferentes. Antes de 2004 no tenía implicación terapéutica la distinción entre adenocarcinoma (AC) y carcinoma escamoso (SCC) y, con frecuencia, junto con el carcinoma indiferenciado de células grandes se agrupaban juntos, bajo la denominación de carcinoma de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) (85% del total de diagnósticos) para distinguirlos del carcinoma de pulmón de células pequeñas (SCLC) (15% del total de diagnósticos) cuyo abordaje terapéutico era diferente de inicio. En el año 2004 se comunica por primera vez la respuesta terapéutica de enfermos con AC y mutaciones del receptor para el factor de crecimiento epidérmico (EGFR) al tratamiento con inhibidores tirosina quinasa anti-EGFR y, desde este momento, se producen importantísimos avances en el conocimiento de la biología molecular del cáncer de pulmón y en el desarrollo de terapias dirigidas a estas alteraciones moleculares, que han supuesto una mejora considerable en la supervivencia de estos enfermos. Por todo lo anterior, hoy en día, es absolutamente necesaria la distinción histológica precisa entre AC y SCC, así como el análisis de las alteraciones moleculares que pueden ser dianas terapéuticas. Sin embargo, si se tiene en cuenta que el 70 % de los pacientes con cáncer de pulmón se diagnostican en estadio avanzado, no resecable, esta precisión diagnóstica hay que alcanzarla sobre biopsias pequeñas y especímenes citológicos, en los que hay además la necesidad de realizar estudios moleculares con finalidad terapéutica. Conseguir este objetivo puede ser un reto en muestras tumorales pequeñas de tumores de pulmón primarios o metastásicos obtenidos por aspiración con aguja fina (FNA) o de biopsias broncoscópicas muy pequeñas, en las cuales la clasificación precisa del tumor puede estar impedida por la existencia de escasas células viables y/o por ser tumores pobremente diferenciados. Existe en la actualidad un panel limitado de marcadores inmunohistoquímicos que ayudan a distinguir entre los diferentes tipos histológicos en NSCLC. Es por todo ello, que se decidió valorar en este estudio nuevos marcadores inmunohistoquímicos, PKP1, KRT15 y DSG3 en cáncer de pulmón de células no pequeñas y determinar la tinción inmunohistoquímica tanto en núcleo como citoplasma y membrana para incorporar esas diferencias al diagnóstico diferencial entre AC y SCC. De igual forma se ha hecho una valoración de los marcadores inmunohistoquímicos convencionales. En el presente trabajo se pone de manifiesto que, en relación con la expresión de los marcadores inmunohistoquímicos convencionales, entre los marcadores CK7, TTF1 y Napsina A, característicos de AC, y CK 5/6, p40 y p63, característicos de SCC, solo TTF1 en AC y p40 en SCC fueron específicos en ≥94 % de las muestras utilizadas en el estudio con ≥94 % de verdaderos positivos. En el caso de los nuevos marcadores PKP1, KRT15 y DSG3, la tinción de membrana fue específica para ≥94 % de las muestras de SCC, con ≥94 % de verdaderos positivos en las muestras utilizadas en el estudio. En cuanto al panel de anticuerpos estudiado, la clasificación tanto de las muestras de AC como las de SCC fue más eficaz cuando los anticuerpos se aplicaron sucesivamente de forma escalonada. El modelo de regresión logística multivariante paso a paso determinó que la combinación de los marcadores CK5/6, p63 y PKP1 en la membrana dio un porcentaje de clasificación correcta del 94,6 % en muestras de AC y de 97,6 % en muestras de SCC. Se proponen dos paneles para el diagnóstico de SCC que proporcionan una especificidad del 100 %: Panel 1- tinción positiva de membrana para PKP1 y DSG3 y tinción negativa para TTF1; con un área bajo la curva (AUC) de 0,7619. Panel 2- tinción positiva de membrana para PKP1, DSG3 y KRT15 y tinción negativa para TTF1 y Napsina A; con un área bajo la curva (AUC) de 0,7375. Así mismo, se proponen dos paneles para el diagnóstico de AC que proporcionan una especificidad del 100 %: Panel 1- tinción negativa de membrana para PKP1 y DSG3 y tinción positiva para TTF1; con un área bajo la curva (AUC) de 0,8552. Panel 2- tinción negativa de membrana para PKP 1, DSG3 y KRT15 y tinción positiva para TTF1 y Napsina A; con un área bajo la curva (AUC) de 0,8088. En los estudios de supervivencia de los pacientes en relación con la expresión de los distintos marcadores inmunohistoquímicos, se establece la existencia de una relación entre niveles altos de ARN y proteína de PKP1 (y, en menor medida, DSG3) con una supervivencia general más prolongada para la cohorte de pacientes de la base de datos TCGA-LUSC (The Cancer Genome Atlas).