Evaluación de ratas Sprague Dawley como biomodelo para detectar daño en el ADN de leucocitos de sangre periférica y células hepáticas, mediante el ensayo Comet

Abstract

Las rupturas de cadena simple y la formación de sitios lábiles al álcali en el ADN han sido parámetros ampliamente utilizados para la detección de genotoxicidad y han sido demostradas sus implicaciones en enfermedades degenerativas, el cáncer, y recientemente están vinculadas al estrés oxidativo. Este artículo tuvo como objetivo realizar una comparación en cuanto a la frecuencia espontánea (basal) e inducida con ciclofosfamida, de las rupturas de cadena simple y la formación sitios lábiles al álcalis en el ADN de leucocitos de sangre periférica y células hepáticas en ratas Sprague Dawley de ambos sexos, mediante el ensayo Comet. Se administraron 10 ratas/sexo/grupo durante 14 días, utilizando un grupo control negativo (no administrado), dos controles con sustancias vehículo y un control positivo administrado con ciclofosfamida 50 mg/kg por vía intraperitoneal. Pasado este tiempo se realizo la electroforesis alcalina de células inviduales en gel de leucocitos de sangre periférica y de las células hepáticas, para demostrar el posible daño en el ADN. Se concluyó que esta línea de rata constituye un buen modelo experimental in vivo para demostrar el daño primario en el ADN dado la baja frecuencia espontánea de los indicadores analizados. Además bajo nuestras condiciones experimentales resulta más factible la utilidad de este biomodelo en las determinaciones de daño en leucocitos de sangre periférica en ambos sexos.

The induction of strand breaks (SB) or alkali-labile sites formation on DNA have been parameters broadly used for the genotoxicity detection and their implications have been demonstrated in degenerative illnesses, the cancer, and recently linked to the oxidative stress. This article had as objective to carry out a comparison to the spontaneous basal frequency and induced with cyclophosphamide, the induction of strand breaks or alkali-labile sites formation on DNA of leukocytes of peripheral blood and hepatic cells of Sprague Dawley rats of both sexes, by means of the Comet Assay. We administered 10 rats/sex/group for 14 days, using a negative control group (not administered), two substance-vehicle controls and positive control cyclophosphamide administered with 50 mg/kg, intraperitoneal route. The last time of administered was performed the alkaline electrophoresis them gel individual cells from leukocytes of peripheral blood and hepatic cells to demonstrate the possible damage to the DNA. These rat line constitute a good in vivo experimental model to demonstrate the primary damage in the DNA given the low spontaneous frequency of the analyzed indicators. Also under our experimental conditions it is more feasible the biomodels utility in the determinations of damage in leukocytes of peripheral blood in both sexes.