Reconstitución de la 3-hidroxi-3-metilglutaril-Coa reductasa en vesicular fosfolipídicas

Abstract

Se ha efectuado, por vez primera, la reconstitución "in vitro" de la hmg-coa reductasa, solubilizada previamente a partir de microsomas hepáticos de pollo, en vesículas fosfolipidicas de composición controlable. El procedimiento utilizado se basa en la incubación del material solubilizado en tritón x-100 con mezclas definidas de diferentes lípidos. Se ha establecido la idoneidad del procedimiento en el estudio de las interacciones lipido proteina existentes entre la hmg-coa reductasa y su entorno membranoso. Se ha descrito, por vez primera un procedimiento practico para la extracción y determinación cuantitativa y simultanea de los lípidos y las proteínas contenidas cuantitativa y simultáneamente en la misma muestra problema. Se ha obtenido una evidencia directa del efecto inhibidor que el colesterol libre incorporado a la membrana ejerce sobre la actividad hmg-coa reductasa reconstituida, y cuya magnitud oscila entre el 35% y el 50%. El efecto observado es progresivo, aumentando con la concentración de colesterol, es específico, corelacionable fisiológicamente y dependiente de la integridad de la membrana, se trata de un efecto directo, no mediado por proteolisis de la enzima. Por vez primera, se ha establecido, de un modo directo, el potencial regulador que, en respuesta a una situación fisiológica concreta, poseen los lípidos de la membrana sobre la actividad de moléculas de reductasa heterólogas.