The determination of benzalkonium chloride in eye drops

Abstract

Aim: A novel sensitive kinetic photometric method for the benzalkonium chloride determination has been developed. Materials and method. The method is based on the ability to inhibit the reaction of acetylcholine hy-drolysis by cholinesterase. The reaction rate is evaluated by the non-hydrolysed acetylcholine residue, which is determined by the amount of Peracetic acid, produced during the interaction with the excess of solution hydrogen peroxide . Indicator reaction is an interaction of p-phenetidine with Peracetic acid that leads to the formation of 4,4’-azoxyphenetole with λmax = 358 nm (log10ε =4.2).Results: The conditions affecting the reaction (reagents concentration, pH, order of addition of reagents, stability in time) have been optimized. The linear dependence has been obeyed in the range of (1.4 to 8.4)·10-6 of benzalkonium chloride with correlation coefficient of 0.999. The assay limit of quantitation (20 % of the inhibition degree) has been 1.9·10-6 mol L-1.Conclusion: The proposed method has been successfully applied to the analysis for eye drops and al-lowed to confirm accuracy and reliability of the results obtained.

Objetivos: Se ha desarrollado un nuevo método fotométrico cinético sensible para la determinación de la presencia del cloruro de benzalconio. Material y métodos: El método se basa en la capacidad de inhibir la hidrolisis de acetilcolina en presencia de colinesterasa. La velocidad de reacción se estima mediante el residuo no hidrolizado de acetilcolina, que está determinado por la cantidad de ácido peracetico formado durante la interacción de la acetilcolina con el exceso de peróxido de hidrogeno. La reacción indicativa es la interacción de -etoxianilina con ácido peracetico, que da como resultado la formación de 4,4’-azoxifenetol con λmax = 358 nm ((log10 =4.2). Resultados: Las condiciones óptimas seleccionadas para llevar a cabo el experimento. El experimento se llevó a cabo en el rango de concentraciones (1.4 to 8.4·10-6 mol L-1 de cloruro de benzalconio. el coeficiente de correlación fue 0.999. Los límites de la definición de análisis (20% del grado de inhibición) fueron 1.9·10-6 mol L-1. Conclusiones: El método propuesto se aplicó con éxito en el análisis de gotas oculares у permitió confirmar la precisión у fiabilidad de los resultados.