Elaboración y evaluación morfoestructural de un sustituto completo del paladar duro generado mediante ingeniería tisular

Abstract

INTRODUCCIÓN Los pacientes afectados de fisura palatina precisan de intervenciones quirúrgicas para obtener una función adecuada, para ello se utilizan generalmente colgajos de fibromucosa palatina. Estas técnicas quirúrgicas pueden interferir en el desarrollo facial y de la dentición, así como el habla y en deglución. La Ingeniería Tisular puede contribuir a reparar el paladar fisurado aportando tejidos artificiales con células, soportes y señales moleculares, aunque estos procedimientos no son utilizados de forma rutinaria. Al estar en el paladar fisurado afectados la mucosa y el hueso, el enfoque de la ingeniería tisular debería ser la generación de un sustituto palatino que englobe la combinación de estas estructuras. La mayoría de los tejidos que se están desarrollando para la reconstrucción del paladar fisurado son constructos de un solo tejido (mucosa o hueso). La creación de un sustituto palatino de espesor completo es potencialmente muy importante desde un punto de vista clínico, y contribuiría a conseguir una corrección más fisiológica y funcional. El desarrollo de la compresión plástica y las técnicas de nanoestructuración permiten elaborar estructuras tridimensionales y combinarlas fusionando diferentes tejidos en un único órgano multicapa.

DESARROLLO Se realiza un estudio de experimentación básico en laboratorio (fase in vitro) y en animales de experimentación (fase in vivo) con conejos de laboratorio New Zealand machos al destete. Una vez obtenidas las muestras de mucosa palatina y tejido adiposo de los animales de laboratorio bajo anestesia general, se procedió al tratamiento de dichas muestras para obtener células específicas de cada tejido y desarrollar un sustituto palatino multicapa con ayuda de las técnicas de nanoestructuración y compresión plástica. Este sustituto palatino multicapa se injertó de forma autóloga en defectos ostemucosos realizados en el paladar de los animales. Se realizó un análisis morfométrico, histológico, histoquímico e inmunohistoquímico tras el sacrificio del animal a los 3 meses, para evaluar el crecimiento, la integración, la función celular y la diferenciación del tejido injertado. RESULTADOS El crecimiento mejoró cuando se injertó el sustituto palatino multicapa, siendo similar al de los animales control y significativamente mejor que en los controles negativos. El sustituto palatino multicapa presenta una histología similar a los tejidos control, pero en la fase in vitro presenta una diferenciación epitelial pobre, aunque expresa citoqueratinas 4 y 13. El tejido injertado (in vivo) se asocia a una mayor, diferenciación, estratificación epitelial y maduración tisular, aunque la expresión de citoqueratinas no alcanzó los niveles del tejido control. El análisis in vitro histoquímico del estroma de la mucosa oral y del hueso detectó una expresión débil de proteoglicanos, fibras elásticas y colágenas y depósitos minerales. Sin embargo, tras el injerto, el sustituto palatino multicapa presenta una diferenciación, aunque la expresión no llega a ser igual a la de los tejidos controles, excepto para el colágeno en la capa ósea.

CONCLUSIONES Los resultados obtenidos en la presente Tesis Doctoral sugieren que los sustitutos palatinos multicapa podrían ser útiles para el tratamiento de pacientes a los que es preciso reparar defectos palatinos osteo-mucosos, contribuyendo a un mejor desarrollo morfo-funcional e histológico de los tejidos a reparar.

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