Control del calidad de sistemas adhesivos dentales en un modelo experimental “in vitro” de fibroblastos gingivales humanos

Abstract

En este trabajo se evaluó la viabilidad de fibroblastos gingivales humanos en contacto con distintos sistemas adhesivos dentales mediante la utilización del método de cuantificación de LDH libre y de un análisis morfológico. Se utilizaron fibroblastos gingivales humanos cultivados en placas de 24 pocillos a una concentración de 20000 células/500 ìl de medio de cultivo DMEM con 10% FBS y antibióticos. Los materiales evaluados fueron: Adper SE Plus (ADSE), Adper Single Bond (SB) y One Coat (OC). A las 24 horas se realizó la cuantificación de la liberación de la enzima lactato deshidrogenasa (LDH) en un lector de placas ELX-800. Para el análisis morfológico las células adheridas en los pocillos fueron observadas con un microscopio óptico de luz invertida Nikon Japan Optifhot-2. Las células controles no recibieron tratamiento. Al evaluar LDH los valores fueron: ADSE 42,1%, SB 46,5%, OC 39,6%. A nivel morfológico las células en contacto con los distintos materiales usados en la experiencia mostraron alteraciones caracterizadas por células que toman formas esféricas y que presentan ruptura de sus membranas plasmáticas. En conclusión, los distintos sistemas adhesivos dentales utilizados generarían alteraciones irreversibles en la viabilidad celular de los fibroblastos gingivales humanos por la ruptura de sus membranas plasmáticas.

The objetive of this study was to evaluate human gingival fibroblast viability in contact with different dental adhesive systems by means of both free LDH quantification method and morphological analyses. Human gingival fibroblast grow to in 24 wells plates to 20.000cells/500ul concentration DMEM culture medium whith 10% and antibiotics were used. Materials assessed were: Adper SE Plus (ADSE), Adper Single Bond (SB), One Coat (OC). After 24 hours deshidrogenasa lactate enzyme releasing quantification was performed. The analysis was carried out through ELX- 800 (Biotek) plates reader. For morphologic analysis cells adhered in the wells were observed by light microscopy Nikon Japan Optifhot-2. Control cells were not treated. When evaluating LDH, results were: ADSE 42,1%, SB 46,5%, OC 39,6%. At morphogical level cells in contact to different experimental materials showed some alterations characterized by cells which become spherical and present plasmatic membrane disruption. These results allow us to conclude that different dental adhesive systems used do creat or posibility cellular viability irreversible alterations in human gingival fibroblast due to plasmatic membrane disruption.