Preservación hipotérmica del intestino delgado: un estudio morfológico mediante microscopía electrónica de barrido

Abstract

Introducción: El objetivo del presente estudio es analizar el efecto de soluciones cristaloides simples (solución salina y solución de Ringer Lactato) y una solución de preservación de órganos compleja (solución Celsior) sobre la la pared intestinal de ratones mediante el empleo de microscopía electrónica de barrido tras su preservación hipotérmica. Material y Métodos: Los segmentos intestinales de íleon procedentes de ratones CD1 fueron perfundidos por vía vascular e intraluminal con soluciones cristaloides simples como el suero salino (grupo 2) o solución de Ringer-Lactato (grupo 3), y con soluciones complejas como la solución Celsior (grupo 4). Los segmentos fueron almacenados durante 14 horas a 4º C con la misma solución empleada para su perfusión. Las diferentes muestras fueron procesadas utilizando protocolos convencionales para microscopia electrónica de barrido. Resultados: Nuestros resultados muestran que el grupo 2 se caracterizó por presentar un patrón vellositario y microvellositario compatible con el grupo control (grupo 1). El grupo 3 mostró lesiones focales caracterizadas por pérdidas epiteliales a nivel del vértice vellositario y exposición del eje conjuntivo-vascular de la vellosidad. Finalmente, el grupo 4 presentó un patrón vellositario desestructurado con hendiduras subepiteliales extensas, así como destrucción de células enterocíticas hasta la base. Discusión: El estudio demuestra que las soluciones cristaloides simples administradas por vía vascular e intraluminal mantienen la integridad morfológica de la mucosa intestinal tras su preservación hipotérmica. La microscopia electrónica de barrido constituye una metodología óptima en la valoración topográfica del daño tisular inducido por diferentes protocolos de preservación.

Introduction: The aim of this study is to analyze the effect of simple crystalloid solutions (saline and Ringer lactate solution) and an organ preservation solution (Celsior) on murine intestinal ileal mucosa by scanning electron microscopy after hypothermic preservation. Material and Methods: The intestinal segments of ileum from CD1 mice were intravascularly and intraluminally flushed with 3 different preservation solutions. The used solutions were the simple crystalloid solution normal saline -group 2- and Lactated Ringer (LR) -group 3-. As organ preservation solution, the solution Celsior -group 4- was used. The segments were stored for 14 hours at 4 ° C with the same solution used for perfusion. The samples were processed using standard protocols for scanning electron microscopy. Results: Our results show that group 2 was characterized by villous and microvilli pattern similar to the control group (group 1). The group 3 showed focal lesions characterized by missing epithelium at the apex level and the exposure of the connective-vascular axis of the villi. Finally, group 4 presented a disrupted villous pattern with extensive subepithelial clefts as well as complete denuded villi. Discussion: This study shows that simple crystalloid solutions administered via vascular and intraluminal maintain morphological integrity of the intestinal mucosa after hypothermic preservation. In addition, scanning electron microscopy is an optimal methodology to evaluate the topographical tissue damage induced by various preservation protocols.