Determinación por cromatografía de líquidos y estudio farmacocinético del sulfato de salbutamol en el plasma de conejo

Abstract

Desarrollar y validar un método de cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC) exacto, preciso, específico y sencillo con detección de UV para la determinación de sulfato de salbutamol en el plasma de conejo. Se agregó estándar interno (cloramfenicol) a 0,5 ml de plasma de conejo. Se extrajeron sulfato de salbutamol y cloramfenicol en 5 ml de di(2-etilhexil) fosfato 0,1 M en cloroformo. La fase de cloroformo se trató con ácido clorhídrico 0,5 M y se analizó una alícuota de fase acídica mediante un sistema de HPLC de fase inversa equipado con una columna analítica C18 de 4,6 × 250 mm i. d. y detección de UV (λ = 276 nm). La fase móvil consistió en agua (70%), metanol (20%) y acetonitrilo (10%), y su velocidad de fl ujo fue de 1,2 ml/min. No se detectaron picos de interferencia de componentes endógenos en los cromatogramas de plasma sin aditivos. El fármaco y el estándar interno se elucionaron a 3,0 y 15,4 minutos, respectivamente. La proporción del área pico fármaco/estándar fue lineal frente a la relación de concentración del fármaco que resultó ser lineal (r=0,992) sobre 100-1500 ng/ml. La efi cacia de la extracción fue superior al 80,00% y la concentración de cuantifi cación mínima fue 100 ng/ml (CV<10%) basada en 500 ìl de plasma. El coefi ciente intradía de variación (CV) osciló entre el 1,9 y el 6,2%, y el interdía osciló entre el 1,1 y el 8,9%. El porcentaje de recuperación de sulfato de salbutamol en plasma osciló entre el 98,97 y el 102,41%. El ensayo fue sencillo, sensible, preciso y exacto para su uso en estudios farmacocinéticos del sulfato de salbutamol en conejos. El método mencionado se utilizó para estudiar la farmacocinética de los comprimidos convencionales, los comprimidos de disolución rápida y el recubrimiento de sulfato de salbutamol de disolución rápida después de la administración oral a conejos.

To develop and validate a simple, specific, precise and accurate HPLC method with UV detection for the determination of salbutamol sulphate in rabbit plasma. To 0.5 ml of rabbit plasma internal standard (chloramphenicol) was added. Salbutamol sulphate and chloramphenicol were extracted to 5 ml of 0.1 M-bis-(2 ethyl hexyl) phosphate in chloroform. The chloroform phase was treated with 0.5 M hydrochloric acid and an aliquot of the acidic phase was analyzed by a reverse phase HPLC system equipped with 4.6 × 250 mm i. d. C18 analytical column and UV detection λ = 276 nm). Mobile phase consisted of water (70%), methanol (20%) and acetonitrile (10%) and its fl ow rate was 1.2 ml/min. There were no interfering peaks from endogenous components in blank plasma chromatograms. The drug and internal standard eluted at 3.0 and 15.4 min, respectively. The peak drug/IS area ratio was linear versus drug concentration relationship was linear (r=0.992) over 100-1500ng/ml. The extraction effi ciency was greater than 80.00% and minimum quantifi cation concentration was 100 ng/ml (CV<10%) based on 500ìl of plasma. The intraday coeffi cient of variation (CV) ranged from 1.9 to 6.2% and interday varied from 1.1 to 8.9 %. The % recovery of salbutamol sulphate in plasma range from 98.97 to 102.41%. The assay was simple, sensitive, precise and accurate for the use in pharmacokinetic studies of salbutamol sulphate in the rabbit. The mentioned method was used to study the pharmacokinetics of conventional tablets, fast dissolving tablets and fast dissolving fi lm of salbutamol sulphate after oral administration in rabbits.