Hook effect in radioligand assay for Anti Glutamic Acid Decarboxylase (Anti-GAD65). Influence of temperature and physicochemical interpretation

Abstract

Background: Radioligand assay is one of the principal methods used for analytical determination of the Anti-GAD65 concentration. We studied the influence of temperature on the calibration curves obtained by such a method Matherial and Methods: We used a commercially available RIA kit for Anti-GAD65 and a gamma counter. Data was analyzed using Statistica software. Results and Discusion: Activities bound to the antibody increase with temperature. There was a decrease in activity for high concentrations attributable to the "hook effect". We propose a simple physicochemical model that justifies satisfactorily the results.

Objetivo: El análisis por radioligando es uno de los métodos principales utilizados en la determinación analítica del Anti-GAD65. Se ha estudiado la influencia de la temperatura sobre las gráficas de calibración obtenidas por dicha técnica. Material y Métodos: Usamos un kit comercial para Anti-GAD65 y un contador gamma. Los resultados son analizados mediante el programa Statistica. Resultados y Discusión: Las actividades ligadas al anticuerpo aumentan con la temperatura. Se observa una disminución de la actividad para altas concentraciones atribuible al llamado “efecto anzuelo”. Se propone un sencillo modelo fisicoquímico que justifica satisfactoriamente los resultados