X-linked thrombocytopenia in a female with a complex familial pattern of X-chromosome inactivation

Abstract

The Wiskott–Aldrich syndrome (WAS) is an X-linked recessive disorder characterized by thrombocytopenia, eczema and various degrees of immune deficiency caused by mutations in the WAS gene, which encodes the WASP protein, the expression of which is restricted to haematopoietic cells. Mild allelic variants are associated with X-linked thrombocytopenia (XLT). Female carriers tend in general to be asymptomatic as a consequence of a positive selection of cells with an active normal X chromosome, which results in a non-random inactivation of the mutated gene in affected cell lineages. We report on six female members of the same family carrying the mutated WAS allele p.V332A, which is known to be associated with XLT. One of them had presented severe thrombocytopenia from birth. Western blotting showed the WASP protein in peripheral blood cells to be normal in size and expression, and scanning electron microscopy revealed a normal distribution of microvilli on T cells. X-chromosome inactivation-pattern analysis showed total inactivation of the non-mutated paternal X chromosome in the patient's peripheral blood cells. All the other female family members were healthy and presented varying X-chromosome inactivation patterns, ranging from random X chromosome inactivation to total X-chromosome inactivation of the mutated chromosome. Our results in these female carriers of p.V332A show that manifestation of the disease requires a total inactivation of the non-mutated X chromosome and allow us to confirm that clinical manifestations in female carriers are highly dependent not only on the mutation characteristics but also on the X-chromosome inactivation pattern of affected line.

El síndrome de Wiskott-Aldrich (WAS) es un trastorno recesivo ligado al cromosoma X que se caracteriza por trombocitopenia, eccema y diversos grados de inmunodeficiencia causados por mutaciones en el gen WAS, que codifica la proteína WASP, cuya expresión se limita a las células hematopoyéticas. Las variantes alélicas leves se asocian con la trombocitopenia ligada al cromosoma X (XLT). Las mujeres portadoras tienden en general a ser asintomáticas como consecuencia de una selección positiva de células con un cromosoma X normal activo, lo que da lugar a una inactivación no aleatoria del gen mutado en los linajes celulares afectados. Presentamos el caso de seis mujeres de la misma familia portadoras del alelo mutado WAS p.V332A, que se sabe que está asociado a la XLT. Una de ellas había presentado trombocitopenia grave desde el nacimiento. El Western blotting mostró que la proteína WASP en las células sanguíneas periféricas era de tamaño y expresión normales, y la microscopía electrónica de barrido reveló una distribución normal de microvellosidades en las células T. El análisis del patrón de inactivación del cromosoma X mostró una inactivación total del cromosoma X paterno no mutado en las células sanguíneas periféricas de la paciente. Todas las demás mujeres de la familia estaban sanas y presentaban diversos patrones de inactivación del cromosoma X, que iban desde la inactivación aleatoria del cromosoma X hasta la inactivación total del cromosoma X mutado. Nuestros resultados en estas mujeres portadoras de p.V332A muestran que la manifestación de la enfermedad requiere una inactivación total del cromosoma X no mutado y nos permiten confirmar que las manifestaciones clínicas en las mujeres portadoras dependen en gran medida no solo de las características de la mutación, sino también del patrón de inactivación del cromosoma X de la línea afectada.