Desarrollo de un pre-test para la detección en casa del virus SARS-COV-2

Abstract

El desarrollo de kits caseros para la detección del SARS-COV-2 es una de las herramientas más eficaces para luchar contra la propagación del virus. Poder realizar test en casa de forma simple y económica, sin necesidad de acudir a un centro médico, constituiría una herramienta importante para el monitoreo diario de contagios. En este TFG se ha desarrollado un test colorimétrico que permite detectar la presencia del SARS-COV-2 en saliva. Este test está basado en el uso de polioxometalatos (POMs) fotocrómicos, un tipo de clúster metálico que cambia de color cuando es reducido mediante irradiación lumínica en presencia de una especie química dadora de electrones. Se ensayaron diferentes polyoxometalatos, PMO (Na6P2Mo18O62 ·24H2O), PMA (H3PMo12O40·xH2O) y PTA (H3PW12O40·xH2O), a diferentes concentraciones, frente a los aminoácidos (aa) con mayor potencial dador de electrones y a diferentes tiempos de irradiación ultravioleta (UV). Sólo la cisteína (Cys), en un rango de concentración del orden de 0 - 2 mM, fue capaz de reducir a PMO y PMA a tiempos de irradiación de 30 min. La reducción de estos POMs es evidente a simple vista por el cambio de color, de transparente o amarillo claro (POM) a azul intenso (POM reducido). A continuación, se estudió la posible interferencia de los componentes de la saliva en la foto-reducción de estos POMs, observándose que en esta ventana de condiciones experimentales, no hay reducción de ninguno de los dos POMs y que por tanto la saliva es un medio válido para realizar el test SARS-COV-2 de forma rigurosa. Finalmente, el ensayo de PMO con la proteína S del SARS-COV-2 fue positivo, poniendo de manifiesto que las Cys de dicha proteína son capaces de reducir a PMO bajo irradiación UV. La intensidad del color azul es lo suficientemente alta como para poder ser detectada a simple vista. Por lo tanto, podemos concluir que el uso de estos polioxometalatos y una simple lámpara UV son suficientes para detectar la presencia de proteína S del SARS-COV-2. Esta metodología podría servir para realizar screening caseros que sirvieran como cribado de test, de tal forma que únicamente los resultados positivos de este test tuvieran que visitar un centro médico para la realización de un test de diagnóstico más riguroso, tipo PCR/antígeno.