APh, vol. 46(2)

Formulación y evaluación de comprimidos sublinguales con sulfato de terbutalina: estudios de optimización e in vivo

Formulación y evaluación de comprimidos sublinguales con sulfato de terbutalina: estudios de optimización e in vivo Narendra, C.; Srinath, M.S.; Prakash Rao, B. La finalidad de este trabajo de investigación es la formulación de un comprimido sublingual de sulfato de terbutalina de acción rápida y mejorar la biodisponibilidad y el cumplimiento de las pautas por parte del paciente. Para la preparación de los gránulos se utilizó una técnica de granulación húmeda. Se prepararon formulaciones basadas en el diseño factorial con variables de formulación 32: la cantidad de celulosa microcristalina (MCC) (X1) y la crospovidona como componente bioadhesivo (X2). Como variables de respuesta se evaluaron la resistencia al aplastamiento, la friabilidad y el tiempo de desintegración (DT). Los principales efectos y términos de interacción se evaluaron cuantitativamente mediante un modelo cuadrático. Los resultados revelaron que la cantidad de MCC y crospovidona afectaban significativamente a las variables de respuesta. La formulación optimizada de comprimidos contiene 31,5 mg de MCC y 4,5 mg de crospovidona, se desintegra en un período corto con un índice DT de 30,2 + 5,5 seg. y tiene una resistencia al aplastamiento suficiente y una friabilidad aceptable. Las concentraciones plasmáticas de terbutalina se obtuvieron a los 5 minutos. Los resultados indican que la crospovidona, un componente bioadhesivo, impide tragar la terbutalina, sin afectar a su liberación y absorción. En conclusión, la formulación del comprimido sublingual se puede extrapolar a otros fármacos en los que se desee una absorción rápida.; The objective of this research was to formulate a sublingual tablet formulation of terbutaline for rapid action, and to improve both bioavailability and patient compliance to therapy. A wet granulation technique was adapted to prepare the granules. Granule formulations were prepared using an adapted wet granulation technique based on a 32 full factorial design. The formulation variables were expressed as follows; quantity of microcrystalline cellulose (MCC), (X1), and bioadhesive component crospovidone, (X2), while crushing strength, friability and disintegration time (DT) were determined as response variables. The main effects and interaction terms were quantitatively evaluated using a quadratic model. The results obtained showed that the quantity of MCC and crospovidone significantly affect response variables. An optimised tablet formulation, containing 31.5 mg of MCC and 4.5 mg of crospovidone, provides a short DT of 30.2 + 5.5 sec with sufficient crushing strength and acceptable friability, while DT for serum concentrations of terbutaline were obtained within 5 min. The results indicate that the inclusion of crospovidone, a bioadhesive component, in sublingual tablet formulations, makes the swallowing of tablets unnecessary, because the release and absorption of the terbutaline in such formulations is acceptably effective. In conclusion, the developed sublingual tablet formulations is of interest, because it can be extrapolated to other drugs, where rapid absorption is desirable.

Desarrollo de un protocolo de análisis de la expresión génica mediante «differential display» que reduce el número de falsos positivos

Desarrollo de un protocolo de análisis de la expresión génica mediante «differential display» que reduce el número de falsos positivos Vieites Fernández, José M.; Sánchez Pozo, Antonio; Gil Hernández, Ángel; Suárez García, Antonio Entre los métodos empleados para los análisis de la expresión de genes, el método de "differential display" ha sido ampliamente utilizado y, a pesar del uso extendido de los "microarrays", es aún un método válido para el análisis con muestras cuyo transcriptoma es desconocido. Con el objeto de reducir el elevado número de falsos positivos que genera esta técnica, hemos optimizado el protocolo para reducir la posibilidad de generar falsos positivos. En primer lugar, hemos marcado radiactivamente el cebador oligo-dT con lo que los fragmentos de DNA identificados son extremos 3'-UTR de RNAm. Por muestra hemos realizado dos transcripciones inversas y dos reacciones de PCR en cada una de ellas. Para seleccionar un fragmento de DNA, debía estar diferencialmente expresado en las 4 reacciones de PCR. Por último, todos los fragmentos fueron clonados y secuenciados por triplicado. Estas modificaciones al protocolo nos ha permitido identificar 5 genes expresados diferencialmente entre células epiteliales de intestino en estado proliferativo y diferenciado.; The analysis of genetic expression, the differential display (DD) method has been widely used, but in spite of the extensive use of the «microarrays» method, it is still to be considered as a valid method for the analysis of samples whose transcriptone is not known. In this work, an attempt has been made to reduce the high number of false positives generated by this technique by optimising method protocol. As a preliminary step, we radioactively marked the oligo dT primer with which the fragments of identified DNA were extreme 3'-UTR of mRNA. For each sample two inverse transcriptions and two PCR reactions were performed. Only fragments of DNA that are expressed differentially in all 4 PCR reactions should be selected. Finally, all of the fragments were cloned and sequenced in triplicate. These protocol modifications have allowed us to identify 5 differentially expressed genes, in intestinal epithelial cells in both proliferative and differentiated states.

Estudios para evaluar el hierro corporal

Estudios para evaluar el hierro corporal Roque, M.; Gatti, C.; Aggio, M. Objetivos: Evaluar el estado del hierro del organismo mediante estudios multiparamétricos combinando el receptor de transferrina soluble (RTfs) con Ferritina, hemoglobina, saturación de transferrina (%). Materiales y Métodos: Adultos Sanos (AS)(n=51) y Anémicos Ferroprivos (AF)(n=50). RTfs y Ferritina se determinaron por ELISA. Resultados: El intervalo de confianza de la media del RTfs IC95(μ) fue 15.5-18.1 nmol/L con un 95% de probabilidad en AS. En el grupo AF el mv y rango del RTfs fueron 66.3 nmol/L y 16.1-148.4 nmol/L, (α) 0.05, respectivamente, y el índice RTfs/F fue mayor (75.8) que en AS (nivel de significación 5%).El estudio de la relación RTfs/Hb (p<0.001), 71% (r2) y Ferritina/ Hb (p<0.001), 70 % (r2), mostró que para valores de Hb <120g/L, el RTfs es más sensible que la Ferritina. El índice RTfs/F (p<0,001), 72% (r2) mostró aumentos significativos para valores de Ferritinas <12μg/L. Conclusiones: Nuestros estudios confirman que el RTfs detecta con eficiencia diagnóstica cambios sensibles del hierro funcional. El uso combinado del RTfs con parámetros convencionales permite una rápida evaluación del estado del hierro.; Objetive: Multi-parameter studies combining serum Transferrin Receptor (sTfR) with Ferritin, hemoglobin, transferrin saturation percentage for an assessment of iron status. Materials and Methods.Subjects: Healthy Adults (HA)(n=51) and Iron-Deficient Anemic Patients (IDAP) (n=50). sTfR and Ferritin were measured by ELISA. Results: Mean confidence interval IC95(μ) showed that the mean value for sTfR was 15.5-18.1 nmol/L (95% probability) in HA group. In IDAP both the sTfR mv and range (66.3 nmol/ L, 16.1-148.4 nmol/L, (α) 0.05), and the sTfR/F Index (75.8) were greater than in HA (5% significance level). TfR/Hb (p<0.001), 71% (r2), and Ferritin/Hb (p<0.001), 70 % (r2), showed that for Hb <120g/ L, sTfR is more sensitive than Ferritin. sTfR/Ferritin (p<0.001), 72% (r2) showed significant sTfR increases for ferritins <12μg/L. Conclusion: Our studies confirm that the sTfR detects iron-sensitive changes with a diagnostic accuracy. The combined use of sTfR and conventional parameters allows for easier iron status assessment.

Una síntesis versátil y eficiente de nuevas cefalosporinas «caballo de Troya»

Una síntesis versátil y eficiente de nuevas cefalosporinas «caballo de Troya» Spaggiari, A.; Blaszczak, L.C.; Prati, F. Se describe un procedimiento útil para la síntesis de nuevas cefalosporinas de doble acción. Estas moléculas podrían representar una herramienta fascinante para el tratamiento de enfermedades infecciosas bacterianas, ya que presentan una posible actividad inhibidora hacia las bacterias que expresan la β-lactamasa. La principal ventaja de este enfoque sintético de tres pasos reside en su versatilidad, que permite la preparación sistemática de un amplio conjunto de nuevas moléculas.; A useful synthesis of new dual-action cephalosporins is reported. These molecules could represent a fascinating tool for treatment of bacterial infectious diseases, since they display a possible inhibitor activity towards β-lactamase-expressing bacteria. The major advantage of this 3-step synthetic approach lies in its versatility, which allows the systematic preparation of a wide pool of new molecules.

Control de calidad de residuos de biocidas en frutos de Silybum marianum L

Control de calidad de residuos de biocidas en frutos de Silybum marianum L Obreshkova, D.; Pencheva, I. Los estudios analíticos de los biocidas organoclorados demuestran que su nivel de concentración en las raíces de plantas es mayor que la concentración en el suelo, y especialmente en las plantas medicinales utilizadas en las industrias farmacéutica y medicinal. Los fármacos búlgaros más utilizados (Carsil, Tribestan y Nivalin) contienen extractos de plantas y deben ser analizados de acuerdo con las directivas de la Comunidad Europea EEC/76/895 y EEC/90/642 1998; Por ello, se ha estudiado el método de cromatografía de gases para la determinación cuantitativa de biocidas organoclorados (HCH e isómeros, DDT y metabolitos). Se han analizado conforme a las regulaciones de la Pharmacopoeia Europea materiales procedentes de plantas de distintas regiones de Bulgaria (frutos de Silybum marianum, L) y grageas de Carsil producidas por Sopharma Ltd. El método ha sido validado y se han estudiado parámetros analíticos de especificidad, linealidad, precisión, replicabilidad y rango.; Analytical studies of organochlorine biocides show that their concentration in the plants (roots) is higher than in the ground and particularly in the medicinal plants used in the therapy and the pharmacy industry. The most favorite Bulgarian drugs (Carsil, Tribestan and Nivalin) contain plant extracts and they have to be analyzed in respect to European Community Directives EEC/76/895 and EEC/90/642 1998; In view of that the gas chromatography method for quantitative determination of organochlorine biocides (HCH and isomers, DDT and metabolites) was studied. Plant material from different regions of Bulgaria (fructus from Silybum marianum, L) and Carsil dragee produced by Sopharma Ltd. were analyzed in respect to European Pharmacopoeia regulations. The method was validated and analytical parameters specificity, linearity, precision, repeatability and range were studied.