Procedimiento de detección de secuencias de ADN específicas de Brucella spp mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) acoplada a un enzimoinmunoensayo (ELISA) Colmenero Castillo, Juan de Dios Queipo Ortuño, María Isabel Morata Losa, Pilar ADN Brucella spp Polimerasas Enzimoinmunoensayo Número de publicación: 2 220 180 Número de solicitud: 200201381 Procedimiento de detección de secuencias de ADN específicas de Brucella spp mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) acoplada a un enzimoinmunoensayo (ELISA). Procedimiento de detección de secuencias de ADN específicas de Brucella spp. mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) acoplada a un enzimoinmunoensayo(ELISA). Después de una amplificación selectiva de una secuencia de 223 pb de Brucella utilizando los oligonucleótidos B4 y B5, los productos amplificados resultantes marcados con digoxigenina (DIG) son hibridados con una sonda de captura biotinilada. Posteriormente, estos híbridos son capturados en placas recubiertas con estreptavidina y detectados usando un conjugado anti-DIG Fab/ peroxidasa. La técnica propuesta se ha mostrado mucho mas sensible que la PCR convencional y que los métodos bacteriológicos y mas específica que los métodos serológicos habituales, permitiendo su utilización para la puesta en práctica de un procedimiento fácil y rápido de diagnóstico molecular de la infección por Brucella spp. en muestras de sangre humana y en otras muestras clínicas, la monitorización de la respuesta al tratamiento y la detección precoz de las recidivas evitando el riesgo de manipulación del germen. 2010-03-15T12:41:23Z 2010-03-15T12:41:23Z 2005-12-16 info:eu-repo/semantics/patent http://hdl.handle.net/10481/2813 es http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/ Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 License Madrid: Oficina española de patentes y marcas