Estimación fluorimétrica del clorhidrato de doxorubicina en plasma, sangre entera y tejidos de ratas

Abstract

Se ha desarrollado un método fluorimétrico rápido y sensible para la estimación del clorhidrato de doxorubicina (DH) en sangre entera y tejidos de ratas. También se ha desarrollado un método relativamente más simple y sensible para la estimación en plasma. Los parámetros analíticos se establecieron y compararon en ambos métodos. Los datos de intensidad de fluorescencia relativa (IFR) de los métodos de estimación de DH en plasma y en sangre entera indican la elevada sensibilidad del método anterior. La comparación de los valores de IFR de la sangre entera y de los tejidos indican una baja extracción de DH de la sangre entera. Los valores bajos de IFR se observaron en tejidos que contienen elementos formadores de sangre, tales como el bazo y el hígado, mientras que en pulmones, riñones y corazón los valores de IFR detectados fueron elevados. La incubación de DH con diversas concentraciones de ADN in vitro mostró una reducción de la IFR del DH en comparación con la IFR inicial, lo que indica una fuerte interacción dependiente de la concentración. Se observaron coeficientes de correlación elevados en pulmones (0,9996), sangre entera (0,9985) y corazón (0,9991). La prueba de interceptación realizada para el método de estimación de DH en plasma y el método de estimación en sangre entera y tejidos indica que no se producen interferencias de blancos en las estimaciones. La prueba ‘t’ realizada para las concentraciones estimadas en los estudios de recuperación no indican ninguna diferencia significativa entre las concentraciones añadidas y estimadas que demuestran la exactitud, y el bajo coeficiente de variación (%) y los límites de confianza indican la precisión de los métodos.

A rapid and sensitive fluorimetric method of estimation of doxorubicin hydrochloride (DH) in whole blood and tissues of rat was developed. A relatively simpler and sensitive method of estimation in plasma was also developed. The analytical parameters were established for both the methods and were compared. The data of relative fluorescence intensities (RFI) of the methods of estimation of DH in plasma and whole blood indicate high sensitivity of the former method. Comparison of RFI values of whole blood and tissues indicate low extraction of DH from whole blood. Low RFI values were observed in case of tissues such as spleen and liver containing blood forming elements, where as, high RFI values were found in case of lung, kidney and heart. Incubation of DH with various concentrations of DNA in vitro, showed a decrease in RFI of DH with time compared to the initial RFI, indicating a strong interaction which is concentration dependant. High correlation coefficients were observed with lung (0.9996), whole blood (0.9985) and heart (0.9991). The test of intercept performed for the method of estimation of DH in plasma, and the method of estimation in whole blood and tissues indicate no interference of blank in the estimations. The ‘t’ test performed for the estimated concentrations in recovery studies indicate no significant difference between the added and estimated concentrations proving the accuracy, and low coefficient of variation (%) and confidence limits indicate the precision of the methods.