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Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/10481/23982

Title: Análisis mediante micromatrices de tejido de marcadores inmunohistoquímicos de utilidad en el diagnóstico diferencial del carcinoma diferenciado de tiroides
Authors: Merino Montes, Julio
Direction: Gómez-Morales, Mercedes
Moral, Raimundo G. del
Collaborator: Universidad de Granada. Departamento de Anatomía Patológica e Historia de la Ciencia
Issue Date: 2013
Submitted Date: 28-Sep-2012
Abstract: Los tumores malignos de la glándula tiroides son las neoplasias más comunes de los órganos endocrinos y dentro de ellos los carcinomas diferenciados son los más frecuentes. No existe ningún procedimiento diagnóstico capaz de distinguir entre ellos y los nódulos tiroideos benignos, que afectan a un porcentaje muy alto de la población general considerándose el método más útil la punción aspiración con aguja fina (PAAF). A pesar de que es el procedimiento de elección la PAAF tiene una serie de limitaciones importantes, especialmente que muchas veses no se puede alcanzar un diagnóstico definitivo en las lesiones con patrón histológico folicular (variante folicular del carcinoma papilar, hiperplasia adenomatosa, adenoma folicular y el carcinoma folicular). Estos casos muchas veces se diagnostican como lesión proliferativa folicular lo que lleva auna intervención quirúrgica, muchas veces innecesaria si se tiene en cuenta que sólo del 15 al 25% de estos casos van a ser un carcinoma. Por otra parte con excepción de la mutación de BRAF, característica del carcinoma papilar, pero que se encuentra sólo en un porcentaje de estas neoplasias no existe un perfil genético específico que distinga los casos malignos de los benignos. PLANTEAMIENTO Y OBJETIVOS Por todo lo expuesto nuestro objetivo ha sido investigar 1) si existe un perfil molecular que distinga los carcinomas diferenciados de tiroides de las lesiones benignas y que pueda ser aplicado preoperatoriamente. 2) Si el análisis molecular permite distinguir las distintas formas de carcinoma diferenciado de tiroides y 3) Si hay un perfil molecular que se relacione con el pronóstico. MATERIAL Y MÉTODOS Se realizó un estudio retrospectivo de material incluido en parafina de distintos procesos benignos y malignos para compararlos entre sí. La serie incluye 18 tiroides normales, 402 lesiones benignas (hiperplasias nodulares, adenomas foliculares, tiroiditis de Hashimoto y enfermedad de graves Basedow) 87 carcinomas papilares, 31 carcinomas foliculares, cinco carcinomas medulares, 3 carcinomas anaplásicos y dos carcinomas pobremente diferenciados. Se construyeron micromatrices de tejido con estos casos seleccionado áreas representativas de cada uno, en un bloque de parafina, tras un examen histológico de todo el material disponible. Cada bloque de matrices incluía 40 muestras obtenidas con una aguja de 2mm de diámetro. De esta forma se construyeron 14 bloques de los que se obtuvieron secciones de 3 micras de espesor que se sometieron a estudio inmunohistoquímico usando un inmunoteñidor Autostainer 480 (Labvisión, California) usando anticuerpos frente a: IMP3, CITED1, Ciclina D1, Ciclina E, P27, P53, P63, PARP-1, TPO, COX2, Galectina 3, CD44s, CD44v6, CD57, E-cadherina, ß-catenina, HBME-1, queratán sulfato, citoqueratina 19 y Ki67. Para el estudio estadístico se utilizó el paquete de análisis de datos R 2.15.0 (R Core Team. R:A Language and Environment for Statistical Computing. R Foundation for Statistical Computing, Vienna, Austria. V. 2.25.0, 2012). En la comparación de grupos se empleó el análisis de la varianza (ANOVA), el test de U Mann Whitney, test de Kruskal Wallis, Chi cuadrado así como la correlación de Spearman, según las variables analizadas. Para la construcción de un modelo de predicción de malignidad frente a benignidad se ha empleado el modelo de regresión logística binaria y análisis multivariante. Para cada anticuerpo empleado se han calculado los índices de sensibilidad, especificidad, valor predictivo positivo y negativo y valor global o precisión. RESULTADOS Y CONCLUSIONES Los resultados obtenidos más relevantes han sido: Con respecto a la edad de los enfermos que integran la serie no hubo diferencias en cuanto a la expresión de marcadores en los mayores de 45 años y los menores de esta edad excepto para 4 de ellos: CD44s, CD44v6, CK19 y HBME1, siendo su expresión menor en el grupo de más edad. En el grupo de patología benigna se observó que tres marcadores CD44s, CD44v6 y HBME-1 tuvieron menor expresión en el grupo de mayor edad (> de 45 años) con respecto al grupo de < de 45 años. Al analizar la patología maligna se observaron diferencias con significación estadistica entre ambos grupos de edad con respecto a tres marcadores: TPO, CD44v6 y CK19, con menor expresión de los tres en el grupo de enfermos de > de 45 años. El análisis de la expresión de los distintos marcadores analizados en los grupos específicos de patologías ha permitido llegar a las siguientes conclusiones: 1. La aplicación de técnicas inmunohistoquímicas para detectar determinados antígenos celulares es un procedimiento útil y de ayuda en el diagnóstico de los carcinomas diferenciados de tiroides. 2. a) El estudio simultáneo de los marcadores Gal-3, HBME-1, ki67, CITED-1 y TPO ha resultado la combinación más útil en nuestro estudio para distinguir los carcinomas diferenciados de tiroides de las lesiones benignas. b) Esta combinación resulta igualmente eficaz si se sustituye la determinación de HBME-1 por la de KS. c) Las combinaciones reseñadas anteriormente son más eficaces para el diagnóstico de carcinoma diferenciado de tiroides que el uso simultáneo de CK19, Gal-3 y HBME-1. 3.Los marcadores que usados de forma individual presentan mayor precisión en el diagnóstico diferencial de los carcinomas diferenciados de tiroides, particularmente para el carcinoma papilar, son el HBME-1 y KS. 4. A pesar de que estos dos marcadores HMBE-1 y KS tienen una eficacia diagnóstica superponible, la distinta distribución célular que presentan indica que los Ac utilizados para su detección reconocen moléculas diferentes. 5. En el carcinoma papilar de tiroides la ausencia de TPO y la expresión de Galectina 3 son característicos de las formas más agresivas y por tanto son marcadores de progresión tumoral. 6. En el carcinoma papilar de tiroides la pérdida de expresión de TPO en el tumor primario se relaciona significativamente con la existencia de metástasis ganglionares en el momento del diagnóstico. Este hecho puede ser de utilidad para replantear la necesidad de completar la cirugía en aquellos casos en que esta fuera incompleta de inicio. 7. En el carcinoma folicular la ausencia de TPO y la expresión de HBME-1 se relacionan con las formas más agresivas y por tanto son marcadores de progresión tumoral. 8. Un valor superior a 3 en nuestra escala, con la tinción inmunohistoquímica para Ki67 utilizando el anticuerpo monoclonal MIB 1, se relaciona con el diagnóstico de carcinoma folicular, un hecho a considerar en el diagnóstico diferencial de las neoplasias foliculares. 9. De nuestro propio estudio y de la revisión de la literatura científica al respecto se deduce la necesidad de establecer protocolos técnicos y de valoración homogéneos para el estudio de marcadores en el diagnóstico diferencial de las neoplasias de tiroides, de forma semejante a los que ya existen para otras neoplasias y que puedan ser reproducibles en los distintos laboratorios de Anatomía Patológica.
Sponsorship: Tesis Univ. Granada. Departamento de Anatomía Patológica e Historia de la Ciencia
Publisher: Universidad de Granada
Keywords: Tiroides
Cáncer
Marcadores (Biología)
UDC: 612.4
616-006
3207
URI: http://hdl.handle.net/10481/23982
ISBN: 9788490283530
Rights : Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 License
Citation: Merino Montes, J. Análisis mediante micromatrices de tejido de marcadores inmunohistoquímicos de utilidad en el diagnóstico diferencial del carcinoma diferenciado de tiroides. Granada: Universidad de Granada, 2013. 329 p. [http://hdl.handle.net/10481/23982]
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