Tipaje de HLA clase II mediante amplificación génica e hibridación con oligonucleótidos

Abstract

Las moléculas hla clase ii tienen como función presentar antígenos a las células inmunocompetentes para iniciar una respuesta inmunológica frente a ellos. al ser moléculas muy polimorficas es necesario caracterizar la composición alelica de los individuos a la hora de buscar compatibilidades en programas de trasplante y estudio de asociaciones hla-enfermedad, hoy por hoy las aplicaciones mas importantes del tipaje hla. para ello se han empleado métodos clásicos tales como la serología y cultivos mixtos linfocitarios. recientemente se han puesto en marcha técnicas de biología molecular, empleadas en este trabajo. sobre un grupo de 38 individuos se ha realizado una reacción en cadena de polimerasa para amplificar las zonas genomicas codificantes de las áreas mas polimorficas de las moléculas hla, y posteriormente hibridarios con paneles locusespecificos de oligonucleotidos especifico de secuencia, deducidos a partir de las zonas de mayor variabilidad alelica. se han aplicados dos técnicas diferentes de hibridación empleando tampones diferentes: tmac (cloruro de tetrametilamonio) y sspe (tampon salino-fosfato). su objeto es valorar la eficacia del tipaje genomico frente al serologico a la hora de la aplicacion a un laboratorio asistencial hla, y estandarizar las condiciones tecnicas idoneas. los resultados obtenidos muestran que el tipaje genómico ha sido eficaz en el tipaje hla, completando la caracterización de tipajes serológicos incompletos. el método tmac ha demostrado ser mas sensible y especifico en su alternativo sspe.